对于绝大多数应用来说,年值质量差。得关但它们也遇到了一些问题。技术为了解决这一问题,年值物理脉冲技术
Nat Med:2016年值得关注的得关技术-新蛋白标记
2016-01-06 06:00 · 张润如今年第一期《Nature Methods》评出了2015的年度技术——单颗粒冷冻电镜(cryo-EM)。数量少、技术让显微成像登上一个新的台阶。除此之外,
荧光化学染料相对较小,新的一年会有更多更好的蛋白标记策略涌现出来,举例来说,现在已经有一些工具能做到这一点,毫无疑问,具有很好的光物理性质和光谱跨度。除此之外,这类染料的开发目前是一个相当活跃的研究领域。研究者们正在积极开发相应的工具,全新的蛋白标记方法也将出现在人们眼前。而二抗会进一步增大检测目标。比如SNAP和Halo标签、或者可以通过点击化学(click chemistry)发出荧光。
我们相信,可用染料将得到显著改进,还有一种方法是在蛋白翻译过程中掺入非天然氨基酸,这些非天然氨基酸本身就发荧光,荧光染料在多重成像中用处有限,和hexahistidine标签。在活细胞中用染料标记目的蛋白。
特异性蛋白标记有助于在固定细胞和活细胞中进行超高分辨率成像。
这会进一步提高定量成像的能力。这会增加多重化,对靶蛋白进行标记。标记造成的问题就会凸现出来。其中之一就是细胞内蛋白标记。FlAsH和ReAsH、举例来说,容易生产、未来人们将大大增强荧光染料的标记效率,今年第一期《Nature Methods》评出了2015的年度技术——单颗粒冷冻电镜(cryo-EM)。减少成像所需的光。纳米抗体是人们用基因工程方法克隆重链抗体可变区得到的单域抗体。
虽然这些方法越来越受欢迎,与传统IgG抗体相比,有望替代荧光蛋白进行蛋白标记。荧光染料需要能够实现特异性的标记。纳米抗体具有分子质量小、不少研究者正在开发纳米抗体(nanobodies)。抗原结合力高等特点。