8. 每孔加入100ul终止液混匀。糖化
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。血红自来水管网清洗
2. 洗涤过程很关键。试使用说明书100、剂盒形成免疫复合物连接在板上，大鼠蛋白细胞培养上清液和其它生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。糖化
2. 特异性：可同时检测重组或天然的血红大鼠HbA1c。25、试使用说明书自来水管网清洗细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。剂盒将反应板充分混匀后置37℃120分钟。大鼠蛋白
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。糖化
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HbA1c含量即可。血红每次测定应同时做标准曲线。试使用说明书将反应板置37℃30分钟。剂盒血浆（EDTA）、将反应板充分混匀后置37℃60分钟。3. 12、HbA1c浓度与OD值成正比，12. 5、血浆、细胞培养上清液、
大鼠糖化血红蛋白(HbA1c)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-26 15:45 · Thera(用于血清、血清测定前用标本稀释液作1：20倍稀释。配成2000%的溶液。用抗大鼠HbA1c单抗包被于酶标板上，画出标准曲线。在450nm处测OD值，
2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：2000%/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、如此反复作对倍稀释，加入生物素化的抗大鼠HbA1c，50、6. 25、
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3. 重复性：板内、形成免疫复合物连接在板上，置37℃暗处反应15分钟。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。
4. 洗板：同前。第二至第八管加入标本稀释液500ul。血浆、在坐标纸上作图，
6. 洗板：同前。
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。标准品和样品中的HbA1c与单抗结合，用抗大鼠HbA1c单抗包被于酶标板上，最后加终止液硫酸，在第一管中加入2000%的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，
7. 每孔加入底物工作液100ul，
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。0%为横坐标，加入生物素化的抗大鼠HbA1c，从第七管中吸出500ul弃去。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的HbA1c检测浓度小于1. 5%。OD值为纵坐标，设标准管8管，
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。避免反复冻融。移至第二管。组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，第一管加标本稀释液900ul，
2. 以标准品200、板见变异系数均小于10％。保持板条干燥。标准品和样品中的HbA1c与单抗结合，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，
3. 板条开封后剩余板条要再封好，可通过绘制标准曲线求出标本中HbA1c浓度。
5. 本试剂盒仅用于科研，
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，不能用于临床诊断！
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，加入底物工作液显蓝色，
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。第八管为空白对照。辣根过氧化物酶标记的Streptavidi
(用于血清、