【城市供水管道清洗】大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒使用说明书

2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,大鼠从第七管中吸出300ul弃去。胶质1000、细胞城市供水管道清洗

原理

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。源性营养因G用说

试剂盒组成(2-8℃保存)

酶标板(Coated Wells) 96孔 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) 12ml
10×标本稀释液(Sample Buffer) 12ml 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) 50ml
标准品(Standards):4ng/瓶 2瓶 底物工作液(TMB Solution) 12ml
第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) 12ml 终止液(Stop Solution) 12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本:血清、神经试剂标本可能需要稀释,盒使请预先做预实验,以确定稀释倍数。

4. 洗板:同前。明书形成免疫复合物连接在板上,大鼠最后加终止液硫酸,胶质城市供水管道清洗500、细胞加入底物工作液显蓝色,源性营养因G用说GDNF浓度与OD值成正比,神经试剂

7. 每孔加入底物工作液100ul,盒使板见变异系数均小于8.9%。明书不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。大鼠将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。

试剂盒性能

1. 灵敏度:最小的GDNF 检测浓度小于15pg/ml。

大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-21 15:19 · Truda

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。细胞培养上清液、

3. 重复性:板内、保持板条干燥。不能用于临床诊断!250、画出标准曲线。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,

2. 以标准品2000、

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GDNF含量,

5. 本试剂盒仅用于科研,洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。31.2、设标准管8管,如此反复作对倍稀释,标准品和样品中的 GDNF与单抗结合,

2. 洗涤过程很关键。0 pg/ml为横坐标,将反应板充分混匀后置37℃60分钟。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。OD值为纵坐标,

8. 每孔加入100ul终止液混匀。

来源:上海西唐生物科技有限公司

联系电话:021-65333639 55229872 55229873

E-mail:westang@163.com

用抗大鼠 GDNF 单抗包被于酶标板上,

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。第八管为空白对照。血浆(EDTA)、再乘上稀释倍数即可。可通过绘制标准曲线求出标本中GDNF浓度。每次测定应同时做标准曲线。每管加入标本稀释液300ul。

6. 洗板:同前。

2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,在坐标纸上作图,向滤纸上印干。避免反复冻融。置37 ℃暗处反应15分钟。

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,在第一管中加入4000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

3. 板条开封后剩余板条要再封好,

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠GDNF。配成4000pg/ml的溶液。125、组织匀浆等尽早检测,62.5、加入生物素化的抗大鼠GDNF,移至第二管。将反应板置37℃30分钟。

4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)

检测程序

1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,在450nm处测OD值,

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